植物组培接种过程是怎么样的

2024-05-29 19:19:11 (33分钟前 更新) 119 3143

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首先外植体  用具都要严格依照实验操作要求杀毒灭菌。实验超净工作台先开半个小时以上,还要用酒精消毒擦拭工作台面。镊子  手术刀都要用酒精灯烧炙杀菌,禁止手过多的在已消毒的器皿上空晃动,禁止手接触已消毒器具。把外植体植入培养基里的时候,尽量快,不能让镊子接触瓶口和瓶内壁,也不能接触到培养基。一般情况下将外植体45度角插入培养基。切记勿让消毒用的升汞接触皮肤!
首先外植体  用具都要严格依照实验操作要求杀毒灭菌。实验超净工作台先开半个小时以上,还要用酒精消毒擦拭工作台面。镊子  手术刀都要用酒精灯烧炙杀菌,禁止手过多的在已消毒的器皿上空晃动,禁止手接触已消毒器具。把外植体植入培养基里的时候,尽量快,不能让镊子接触瓶口和瓶内壁,也不能接触到培养基。一般情况下将外植体45度角插入培养基。切记勿让消毒用的升汞接触皮肤!
雨林之声 2024-05-29
(1)准备阶段:查阅相关文献,根据已成功培养的相近植物资料,结合实际制订出切实可行的培养方案。然后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基,并经高压灭菌或过滤除菌后备用。(2)外植体选择与消毒:选择合适的部位作为外植体,采回后经过适当的预处理,然后进行消毒处理。将消毒后的外植体在无菌条件下切割成一定大小的小块,或剥离出茎尖,挑出花药,接种到初代培养基上。
(1)准备阶段:查阅相关文献,根据已成功培养的相近植物资料,结合实际制订出切实可行的培养方案。然后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基,并经高压灭菌或过滤除菌后备用。(2)外植体选择与消毒:选择合适的部位作为外植体,采回后经过适当的预处理,然后进行消毒处理。将消毒后的外植体在无菌条件下切割成一定大小的小块,或剥离出茎尖,挑出花药,接种到初代培养基上。
小米一箩筐 2024-05-24
1.  培养基的配制
  植物组织培养最常用的培养基为MS培养基,其中包含几十种化合物,在配制培养基时切忌“一锅煮”,就是不能将各种化合物一齐添加进去,因为有些化合物相遇会发生化学反应产生沉淀,影响培养基的营养成分,因此,一定要等到一种成分溶解之后,再缓慢的添加另一种成分,使其成为均一、无沉淀的培养基。
  另外,培养基的pH值会对培养基的硬度造成影响。若将培养基的pH调的过高,则会使培养基变硬,进而增加了接种的阻力,从而对外植体造成损伤。若将培养基的pH值调的过低,则会使培养基不能凝固,起不到固定外植体的作用。因此,将培养基的pH调节至6.0即可。
  2.  外植体的选择
  为了使接种后的诱导得以成功,选择的外植体应该是幼嫩的、处于生长旺盛时期的。而且选择的外植体的体积不能过小,如若过小则会影响愈伤组织的形成,从而影响进一步的分化。因此,一般接种的外植体体积在0.5~1.0cm2的范围内即可。
  3.  消毒
  外植体的消毒主要分为两个阶段。首先是初次消毒,先用流水冲洗,然后用洗衣粉水进行刷洗,以去除表面的污垢,最后用流水冲洗20min,完成第一次的消毒。接下来的消毒步骤要在超净工作台中进行,在各种消毒剂中升汞的杀菌效果最好,但由于其中含有重金属,且实验后的收集工作不易,因此在中学实验中不推荐使用升汞。采用酒精消毒30s,2%~10%的次氯酸钠消毒8~10min即可达到同样的消毒效果。
  4.  接种
  首先,点燃酒精灯,用酒精棉球擦拭双手,再擦拭实验用到的器械,然后在火焰上反复灼烧,放置一旁待到器械温度不高时方可用其进行操作,以免将外植体烫伤。操作过程中,避免双手在培养皿上方来回通过造成外植体的污染,可以在每次修剪完外植体后将培养皿的盖子盖上,以降低污染率。接种前,要将培养基的瓶盖在火焰上迅速灼烧(由于目前大部分学校都在使用塑料组培瓶,因此一定要迅速通过火焰,以防损坏组培瓶),方可进行接种。
  5.  培养
  接种好的培养瓶放置于光照培养架上,每天给予10h的光照即可满足外植体分化对光照的需求。
  6.  炼苗与移栽
  待到无菌苗长至组培瓶的瓶口时即可进行移栽,如若不移栽,则会影响植株的进一步生长,最终导致植株的死亡。移栽之前,首先要对组培苗进行炼苗,具体做法为先闭瓶锻炼3d,再开瓶锻炼3d,以培养基上开始长菌为移栽的标准。
  移栽前,一定要将根部的培养基洗净,如若没有洗净,在种植于土壤中时,培养基的营养成分会加剧土壤微生物的生长,降低组培苗的移栽成活率。为了提高组培苗的成活率,可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。
1.  培养基的配制
  植物组织培养最常用的培养基为MS培养基,其中包含几十种化合物,在配制培养基时切忌“一锅煮”,就是不能将各种化合物一齐添加进去,因为有些化合物相遇会发生化学反应产生沉淀,影响培养基的营养成分,因此,一定要等到一种成分溶解之后,再缓慢的添加另一种成分,使其成为均一、无沉淀的培养基。
  另外,培养基的pH值会对培养基的硬度造成影响。若将培养基的pH调的过高,则会使培养基变硬,进而增加了接种的阻力,从而对外植体造成损伤。若将培养基的pH值调的过低,则会使培养基不能凝固,起不到固定外植体的作用。因此,将培养基的pH调节至6.0即可。
  2.  外植体的选择
  为了使接种后的诱导得以成功,选择的外植体应该是幼嫩的、处于生长旺盛时期的。而且选择的外植体的体积不能过小,如若过小则会影响愈伤组织的形成,从而影响进一步的分化。因此,一般接种的外植体体积在0.5~1.0cm2的范围内即可。
  3.  消毒
  外植体的消毒主要分为两个阶段。首先是初次消毒,先用流水冲洗,然后用洗衣粉水进行刷洗,以去除表面的污垢,最后用流水冲洗20min,完成第一次的消毒。接下来的消毒步骤要在超净工作台中进行,在各种消毒剂中升汞的杀菌效果最好,但由于其中含有重金属,且实验后的收集工作不易,因此在中学实验中不推荐使用升汞。采用酒精消毒30s,2%~10%的次氯酸钠消毒8~10min即可达到同样的消毒效果。
  4.  接种
  首先,点燃酒精灯,用酒精棉球擦拭双手,再擦拭实验用到的器械,然后在火焰上反复灼烧,放置一旁待到器械温度不高时方可用其进行操作,以免将外植体烫伤。操作过程中,避免双手在培养皿上方来回通过造成外植体的污染,可以在每次修剪完外植体后将培养皿的盖子盖上,以降低污染率。接种前,要将培养基的瓶盖在火焰上迅速灼烧(由于目前大部分学校都在使用塑料组培瓶,因此一定要迅速通过火焰,以防损坏组培瓶),方可进行接种。
  5.  培养
  接种好的培养瓶放置于光照培养架上,每天给予10h的光照即可满足外植体分化对光照的需求。
  6.  炼苗与移栽
  待到无菌苗长至组培瓶的瓶口时即可进行移栽,如若不移栽,则会影响植株的进一步生长,最终导致植株的死亡。移栽之前,首先要对组培苗进行炼苗,具体做法为先闭瓶锻炼3d,再开瓶锻炼3d,以培养基上开始长菌为移栽的标准。
  移栽前,一定要将根部的培养基洗净,如若没有洗净,在种植于土壤中时,培养基的营养成分会加剧土壤微生物的生长,降低组培苗的移栽成活率。为了提高组培苗的成活率,可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。
攀爬—蜗牛 2024-05-19

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