金银花木犀草苷的含量如何测定

步骤如下：
1、仪器与试药
 日本岛津LC一2010高效液相色谱仪，Phenome—  flex  Luna  C8(250  mm×4．6  mm，5  Ixm)，紫外光谱测  定用岛津2550型单光束紫外分光光度仪。
 木犀草苷对照品(中国药品生物制品检定所，  供含量测定用，批号：117720—200501)。
 金银花药材为市场抽验样品(批号：070901，  0700902，070801，  20070818，  070701，  20070401，  070711)。水为去离子水，乙腈、四氢呋喃为色谱  纯，磷酸为分析纯。
 2  溶液制备
 2．1  对照品溶液  精密称取木犀草苷对照品  21．37  mg，置50  mL棕色量瓶中，加70％  乙醇制成  427．4  Ixg·mL  对照品储备液。取木犀草苷对照品储备液2  mL于25  mL量瓶中，加70％  乙醇稀释  至刻度，再取稀释溶液3  mL于10  mL量瓶中，加  70％  乙醇稀释至刻度，制成10．26  lxg·mL  的对照  品溶液。
 2．2  供试品溶液取本品粉末(过4号筛)1  g，精  密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人70％  乙醇50  mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250  W，频率33  kHz)1  h，放冷至室温，再称定重量，用70％  乙醇补  足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
 3  色谱条件
 色谱柱：用辛基硅烷键合硅胶柱Phenomenex  Luna—C8(250  mill×4．6  mm，5  lxm)；流动卡目：0．4％  磷酸溶液一四氢呋喃一甲醇(79：11：10)；流速：1  mL·min～；检测波长为350  nm；柱温：30  cC；进样  量：10  lxL。在本色谱条件下，理论板数以木犀草昔  峰计不低于7000。
 4  专属性考察
 精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10  L，  注人液相色谱仪，记录色谱图，见图1。结果样品色  谱图中木犀草苷峰与前后峰的分离度分别为2．89  和1．99，符合高效液相色谱定量分析的要求。理论  塔板数以木犀草苷计为9000以上。
 5  线性关系考察
 取浓度为427．4  lxg·mL一的对照品储备液适  量，加70％  乙醇配制得170．96，85．48，34．192，  17．096，10．2576，8．568，3．4272，1．7138，0．8568  lxg  ·mL一的系列对照品溶液，摇匀，分别进样10  L。  以进样量  (  )为横坐标，峰面积积分值y为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程为：
 Y  ：2．465×10  X  +2．332×10  r=0．9999
 表明木犀草苷进样量在0．86—427．4  lxg的范围内  线性良好。
 6  精密度试验
 精密吸取对照品溶液(10．26  lxg·mL  )10  L，按上述色谱条件，连续进样6次，测得平均峰面  积为934176，RSD为0．71％。结果表明仪器分析的  重复性良好。
 7  供试品溶液的稳定性
 精密吸取供试品溶液(批号20070401)10  lxL，  分别于0，3，6，9，12，15，18，24  h进样测定，测得样  品中木犀草苷的平均峰面积(n：8)为326649，RSD  为1．2％  。结果表明，供试品溶液在24  h内稳定。
 8  重复性试验
 取同一批次(批号20070401)的供试品约0．5，  1，1．5  g，精密称定，按“2．1．2”项下方法制备供试品  溶液，进行含量测定。木犀草苷含量的平均值为  0．057％  ，RSD为1．4％  。结果表明此法重复性良  好。
 9  回收率试验
 取同一批已知含量(批号20070401)的样品(过  4号筛)0．5  g，共9份，每3份为一组，每组分别精密  加人对照品溶液(427．4  lxg·mL  )1．6，2．2，2．8  mL。按“2．1．2”项下方法制备所需溶液，在上述色  谱条件下进行含量测定，计算回收率(n=3)。结果  木犀草苷低、中、高3种浓度的回收率分别为  98．50％  ，99．37％  ，102．76％  ；RSD分别为0．69％  ，  0．16％  。0．15％  。
 10  样品测定
 取不同产地的7批样品各2份，按“2．1．2”项下  方法制备供试品溶液，按上述色谱条件每份溶液分别  进样2次，进行测定，按外标法计算，结果见表1。

这个需要专业得仪器得。一般得药物公司才能精确得测量出。木犀草苷具有较强的呼吸道杀菌作用，降低胆固醇在动脉粥样硬化增强毛细血管的舒张作用，对中枢系统也有一定的作用。作为我国传统名贵中药材的金银花，其标志性成分就是是木犀草苷和绿原酸。正因为有了木犀草苷，加之绿原酸等物质的复合作用下，金银花才有了清热解毒、疏风散热的“降火英雄”美誉，成就其性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪的功效；也才能被广泛应用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等证。而金银花的近亲山银花，虽然功效诉求与金银花相同，但是山银花却不含“木犀草苷”因此其降火功效也会相应打了很多折扣，这也是山银花的身价要远远逊色于金银花的一大主要原因。

采用高效液相色谱法测定金银花不同部位(花,叶,茎的表皮和茎)中木犀草素及其苷的含量.应用Aglient  Zorbax  SB-C18色谱柱,以甲醇(φ甲醇=0.02%)-磷酸溶液(φ磷酸=50%)为流动相测定木犀草素,以乙腈(ρ乙腈=0.5%)(A)-冰醋酸溶液(B)按VA∶VB=1∶9,梯度洗脱至3∶7为流动相测定木犀草苷,流速0.3  mL/min,柱温30  ℃,检测波长350  nm.分析结果表明:木犀草素存在于金银花的花,叶和茎的表皮中;木犀草苷存在于金银花的花和叶中.该方法操作简便、结果准确、专属性强,可用于金银花植物中木犀草素及苷的含量测定.

亲，很高兴为你解答哦。金银花木犀草苷的含量的测定需要借助专业设备，比如高效液相色谱法，采用c柱，流动相分别为乙腈～0.5%醋酸溶液、乙腈一0.04%磷酸溶液、乙腈  一0，5%  磷酸溶液梯度洗脱;甲醇一乙腈一0.4%  磷酸溶液等度洗脱，就可以测出金银花木犀草苷的含量。希望我的回答能给你提供帮助。